目前,嘌呤类物质的前处理技术主要包括酸水解、固相萃取、有机溶剂萃取、超声萃取、热萃取等。医药学论文:谈对嘌呤前处理技术的研究
1.酸水解
酸水解为目前嘌呤类物质测定最传统、最常用的方法。不论是动植物样品、啤酒饮料或血液样品等均可使用该方法,且效果良好。理想的酸应该能将结合态嘌呤完全水解为游离的嘌呤碱基且不降解碱基。最常使用的酸为高氯酸、三氯(氟)乙酸或几种酸按一定比例配比使用。
Fan等通过比较高氯酸、硫酸、甲酸、磷酸和盐酸的水解效果,发现高氯酸水解效果较好,并利用高氯酸水解冬虫夏草测定了其中6种嘌呤类物质的含量。但高氯酸浓度和水解时间对水解效果影响较大,实际操作中需要进行探索。凌云等采用V(三氟乙酸)﹕V(甲酸)﹕V(去离子水)=5﹕5﹕1,90℃水解鸡肉样品12min取得良好效果。尤玉茹等采用三氟乙酸与甲酸(1﹕1)100℃水解啤酒样品1h,测定了啤酒中的腺嘌呤、鸟嘌呤、次黄嘌呤和黄嘌呤。
2.固相萃取
固相萃取法(SPE)是20世纪70年代发展起来的一种强有力的样品分离和浓缩技术,广泛用于各种分析方法的样品前处理。固相萃取法主要是使用固相萃取柱,基于色谱分离的原理,利用固体吸附剂将液体样品中的待分离组分吸附,使其与基体和干扰物分离,然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附,达到分离和富集的目的。杨大进等利用季铵盐固相萃取柱(2g填料,3mL容积,美国Baker公司,产品编号7091-03),pH=3.5的磷酸二氢钾溶液(0.25mol/L)为洗脱液进行洗脱,对婴幼儿配方奶粉中的3种嘌呤核苷酸进行测定。